Der zum Gemeindegebiet Heiligenkreuz gehörende Ort Mayerling erlangte traurige Berühmtheit durch den unter nie ganz geklärten Umständen begangenen Freitod Kronzprinz Rudolfs und seiner Geliebten Baronesse Mary Vetsera in der Nacht von 29. auf 30. Jänner 1889 im gleichnamigen Jagdschloss.
Rudolf hatte drei Jahre zuvor den Landsitz vom Stift Heiligenkreuz erworben und zu einem Jagdschloss umbauen lassen. Nach seinem Tod erwarb Kaiser Franz Josef das Gebäude und ließ Teile davon sowie die angrenzende, aus dem 17. Jahrhundert stammende Laurentiuskirche abbrechen (die 1412 erbaute Vorgängerkapelle wurde während der ersten Türkenbelagerung Wiens 1529 zerstört). Den Rest des Unglücksgebäudes wandelte er in ein Karmelitinnenkloster um; in den Wirtschaftsgebäuden stiftete er ein Franziskanerinnenkloster. Das ehemalige Sterbezimmer des Thronfolgers ist Teil einer Gedächtniskirche. Im gleichen Jahr wurde die neogotische Kirche St. Josef errichtet.